课程编号: 061M5011H |
课时: 40 |
学分: 3.0 |
课程属性: 专业普及课 |
主讲教师:柴团耀等 |
英文名称: Molecular Biology Techniques |
教学目的、要求
本课程为生化与分子生物学专业研究生的学科普及课,同时也可作为其它相关学科研究生的选修课。
分子生物学已经渗透到现代生物学的各个学科分支,其实验技术已被广泛应用于生命科学各个二级学科的基础研究。本课程重点讲授现代分子生物学研究实验技术的方法及其基本原理,发展背景、技术关键、操作要领、结果分析。介绍新技术,新方法及发展动态。为研究生今后从事科研工作实践,设计研究课题的技术路线和方案奠定基础。要求学生具有生物化学、遗传学和分子生物学基础。
预修课程
生物化学,细胞生物学,微生物学,遗传学
教 材
Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Fourth Edition) 2012,
MICHAEL R.GREEN,JOSEPH SAMBROOK, Cold Spring Harbor Laboratory Press.
主要内容
前言(2学时 教师:柴团耀)
1.1分子生物学的基本含义
1.2分子生物学的主要研究内容
1.3分子生物学研究简史
1.4课程内容安排及要求
第一章 分子克隆的工具酶和载体(4学时 教师:柴团耀)
2.1常用工具酶介绍
2.1.1限制性内切酶
2.1.2其它工具酶
2.2常用载体介绍
2.3 GATEWAY载体
2.4 pCAMBIA载体
第二章 目的基因的获得(基因克隆技术)(6学时 教师:柴团耀)
3.1基因克隆常用的方法技术
3.1.1同源基因的克隆技术
3.1.1根据功能蛋白分离目的基因
3.1.2根据mRNA的特异性分离目的基因
3.1.3 DNA插入作用分离目的基因
3.1.4基因的图位克隆
3.2差异表达基因的克隆
3.3数量性状基因的克隆
3.4噬菌体展示表面技术
第三章 基因表达调控的研究(6学时 教师:柴团耀)
4.1基因的结构分析
4.2启动子分离
4.3启动子活性分析
4.4顺式作用元件确定
4.5基因重组及转化技术
4.6内外源基因的相互作用
4.6转基因沉默的预防和利用
4.7 RNAi技术
第四章 分子杂交技术(4学时 教师:柴团耀)
5.1 Southern杂交
5.2 Northern杂交
5.3 Western杂交
5.4原位杂交(in-situ hybridization)
5.5 FISH (Fluorescent in situ hybridization)
第五章 分子文库技术(2学时 教师:柴团耀)
6.1 cDNA和基因组文库的构建
6.2文库的扩增和目的基因的筛选
第六章 外源基因表达技术(2学时 教师:柴团耀)
7.1原核表达系统
7.2真核表达系统
7.3生物反应器
第七章 DNA和蛋白质的相互作用研究(2学时 教师:柴团耀)
8.1凝胶滞后实验
8.2干扰实验(甲基化,尿嘧啶)
8.3 DNAase I 足迹分析
8.4 Southwestern 杂交
第八章 蛋白质和蛋白质的相互作用研究(4学时 教师:柴团耀)
9.1蛋白质配体结合结构域筛选
9.2细菌双杂合系统
9.3酵母双杂交系统
9.4酵母单杂交及三杂交系统
9.5免疫共沉淀技术
第九章 DNA突变技术,基因组定向编辑技术(ZFN/TALEN/CRISPR-Cas),分子标记及基因组关联分析(GWAS)(6学时 教师:柴团耀)
第十章 基因芯片技术,蛋白质组技术及生物信息学技术介绍(2学时 教师:郎明林)
教学方式:课堂讲授为主
考试方式:课堂开卷
参考文献
参考书:Molecular Biology of the Gene(7th Edition)2013, James D. Watson, Tania A. Baker, Stephen P. Bell, Benjamin Cummings Publishing Company.